建立了一种新的甲基睾酮(MT)测定的免疫分析方法。通过将MT与牛血清白蛋白(BSA)偶联制得了MT全抗原MT-3-BSA(Ag_MT)。将Ag_MT经兔子免疫获得了针对MT的多克隆抗体(Ab_MT)。与温度敏感性水凝胶偶联的抗原(PNIP-Ag_MT)和游离半抗原MT竞争性地与有限量的Ab_MT和辣根过氧化物酶(HRP)的偶联物(Ab_MT-HRP)反应。根据临界析相温度以上免疫复合物沉淀的特性进行分离，根据沉淀相HRP催化H₂O₂氧化4-氨基安替比林显色反应的初速度可确定样品中MT的浓度。该法对MT测定的线性范围在50 μg/L～7．5　mg/L，最低检出限为50 μg/L。MT在人血清中的回收率比较满意。

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