气相色谱法(GC)测定大豆中低聚糖含量
作者:全球MRO综合服务商 仪器仪表技术文章来源:全球MRO仪器仪表交易网 点击数: 更新时间:2006-4-15
(一) 方法原理
用GC对糖进行定量时, 对分子量大的四碳糖、五碳糖的衍生物必须选用在高温下稳定的固定液。本法给定的TMS化条件为: 在室温下, 五碳糖完全TMS化后, 至少要在7小时内保持稳定。使用不锈钢柱, 固定液用2% Silicone OV-17(担体Chromosorb W(AW, DMCS)], 采用10℃/min的程序升温分析, 进样口温度高达350℃各种低聚糖分离效果良好。方法适用于含有蔗糖、棉子糖、水苏糖等低聚糖的大豆、小豆、豌豆制品及一般农产食品。
(二) 仪器、试剂
1 仪器 气相色谱仪: 带有火焰电离检测器(FID);柱子: 2根3mm×0.5m的不锈钢柱;旋转式汽化器: 使用25ml圆底烧瓶;微量注射器。
2 试剂 糖标准品: 蔗糖、棉子糖、水苏糖;吡啶: 用氢氧化钾干燥后蒸馏;芘: 作内标物用;六甲基二硅胺烷(hexamethyl disilazan , HMDS);三氟乙酸(TFA)。
(三) 测定步骤
1. 试液溶液的制备 准确称取粉碎粒径在0.5mm以下均匀试样1g, 放入50ml具塞玻璃离心沉降管中, 加正己烷10ml, 充分振摇后离心分离, 用倾注法弃去正己烷层, 再重复一次。将试样中残存的正己烷蒸发除去。加入80%(V/V)乙醇10ml, 并放沸石, 装好冷凝管在水浴上回流30min, 离心分离将乙醇层倾入200ml容量瓶中, 残渣再用80%乙醇10ml,&
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