气相色谱法(GC)测定大豆中低聚糖含量
作者:全球MRO综合服务商 仪器仪表技术文章来源:全球MRO仪器仪表交易网 点击数: 更新时间:2006-4-15
nbsp;充分混匀, 离心分离, 乙醇层并入200ml容量瓶中(反复操作3~4次)。以80%乙醇稀释定容至200ml, 取此液10ml浓缩至干, 作TMS化试样。
2 色谱条件 柱子: 2% Silicone OV-17, Chromosorb W(AW, DMCS 60~80目, 3mm×0.5m, 不锈钢柱;;柱温: 120~340℃(升温);升温速度: 10℃/min; 进样口检测器温度: 350℃;氮气流量: 60ml/min;FID, 氢气流量: 50ml/min; FID, 空气流量, 1L/min;
3. TMS衍生物的制备 取TMS化试样, 加入内标物芘的吡啶溶液(40mg/50ml)500μl, 再加HMDS 0.45ml、TFA 0.05ml, 加塞充分振摇混匀, 使糖溶解, 在室温下放置15~60分钟, 即为TMS衍生物溶液。注入1μl, 进行GC分析。
4. 标准曲线制备 用蔗糖、棉子糖、水苏糖等标准糖(70℃下减压干燥)制备1mg/ml标准液。取适量标准溶液(每种糖含量0~3mg), 置于磨口容器内, 冷冻干燥 。采用2法操作、制备标准糖的TMS衍生物溶液。注入1μl按色谱条件进行GC分析。从得到的色谱图计算糖和内标物的面积。设X为重量比(TMS衍生物溶液中糖的mg量/TMS衍生物中内标物mg量)Y为面积比(糖的峰面积/内标物峰面积), 根据最小2乘法求回归直线即为工作曲线。
(四) 结果计算 首先求出样品GC色谱图上各种糖的峰面积与内标物峰面积之比, 然后再从标准糖制成的工作曲线上查出样品中的各种糖含量
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